Энуклеация ооцитов с помощью фемтосекундного лазера с длиной волны 795 нм – точный и эффективный метод подготовки реципиентного цитопласта

Энуклеация ооцитов фемтосекундным (фс) лазерным излучением является малоинвазивным и эффективным методом подготовки реципиентного цитопласта. Мы уже продемонстрировали возможность полного удаления метафазной пластинки с помощью фс лазера без значительного ухудшения морфологии и жизнеспособности ооцитов. Учитывая дальнейшее развитие фемтосекундной лазерной энуклеации ооцитов для искусственных репродуктивных технологий у человека и переноса ядер соматических клеток у млекопитающих, необходимо тщательно изучить присутствие любых фрагментов ДНК после фс лазерной энуклеации. В данной работе мы выявляли остатки метафазной пластинки с помощью конфокальной микроскопии сверхвысокого разрешения после лазерной энуклеации ооцитов мыши на стадии метафазы II. Лазер был настроен на 795 нм в режиме 80 МГц с энергией в импульсе 0,5 нДж. С помощью микроскопии сверхвысокого разрешения (Airyscan 2) мы обнаружили незначительные фрагменты метафазной пластинки в ооцитах, подвергшихся воздействию лазера. Однако тщательная лазерная обработка способна обеспечить реципиентный цитопласт без каких-либо обнаруживаемых фрагментов ДНК.